RNA-Extraktion

Hansjürgen Lerch November 30, 2016 R 2 0
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RNA-Extraktion ist die Reinigung von RNA aus biologischen Proben. Dieses Verfahren wird durch das ubiquitäre Vorhandensein Ribonuklease Enzyme in Zellen und Geweben, die rasch RNA abbauen können kompliziert. Mehrere Verfahren sind in der Molekularbiologie verwendet werden, um RNA aus Proben zu isolieren, ist die häufigste von diesen ist Guanidiniumthiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktion. Das Filterpapier auf der Basis der Lyse und Elution Verfahren zeichnet sich durch hohe Durchsatzleistung.

RNA-Extraktion in flüssigem Stickstoff, die üblicherweise mit einem Mörser und Stößel, oder spezielle motorisierten Schleifvorrichtung Zelllyse Gerät ist auch nützlich bei der Verhinderung von Ribonuklease-Aktivität.

RNase Kontamination während der RNA-Extraktion

Die Extraktion der RNA in der molekularbiologischen Experimenten durch die Anwesenheit von ubiquitär und Hardy RNasen, die RNA-Proben abgebaut kompliziert. Bestimmte RNasen können extrem robust und Inaktivierung von ihnen ist schwierig im Vergleich zum Neutralisieren DNasen. Zusätzlich zu den zellulären RNAsen die freigesetzt werden, gibt es mehrere RNasen, die in der Umgebung vorhanden sind. RNasen entwickelt haben, um viele extrazelluläre Funktionen in verschiedenen Organismen haben. ZB RNase 7, ein Mitglied der RNase A-Superfamilie durch menschliche Haut sekretiert und dient als ein potenter antipathogen Verteidigung. In diesen sezerniert RNasen, die enzymatische RNase-Aktivität können nicht einmal notwendig sein für die neue, exapted Funktion. B. Immun RNasen wirken durch Destabilisierung der Zellmembranen der Bakterien.

Um dem entgegenzuwirken, wird Ausrüstung für die RNA-Extraktion verwendet in der Regel gründlich gereinigt, dürfen nicht in den gemeinsamen Laborgeräte und mit verschiedenen ätzenden Chemikalien, die RNasen zerstört behandelt. Aus dem gleichen Grund, Experimentatoren besondere Sorgfalt walten zu lassen ihrer nackten Haut berühren Sie die Geräte.

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